IL-33 i ST2 obejmują krytycznie indukowany biomechanicznie i kardioprotekcyjny układ sygnalizacyjny cd

Wyniki były podobne do wyników analizy poboru leucyny. Dane te silnie sugerują, że IL-33 jest mechanicznie indukowanym ligandem dla ST2L i że sST2 blokuje sygnalizację IL-33 / ST2L. Figura 2IL-33 blokuje bodźce prohypertroficzne w kardiomiocytach, a sST2 hamuje IL-33. (A) IL-33 wykazała nieistotną tendencję do stymulowania hipertrofii, ale IL-33 blokowała angiotensynę II. i indukowany fenylefryną (Phe) leucyny w sposób zależny od dawki. (B) sST2 zależnie od dawki odwracał działanie przeciwhipertroficzne IL-33 pod wpływem angiotensyny II i fenylefryny. (C) Przeciwciało monoklonalne anty-ST2L, które blokuje związaną z błoną aktywność wiążącą receptor receptora ST2L, blokowało przeciwhipertroficzne działanie IL-33, w przeciwieństwie do kontrolnej IgG. (D) Sake2 nie wpływało na pobieranie leucyny w porównaniu z białkiem 2 spokrewnionym z białkiem podstawowym lub kontrolnym IL-1R (IL-1Rrp2), ale dalej zwiększało przerost w angiotensynie II i fenylefrynie. Dane pochodzą z 3. 5 zestawów eksperymentów. (E) Ilościowa analiza pomiarów wielkości komórek in vitro komórek kardiomiocytów była zgodna z testami włączania leucyny (n = 200 każdy). * P <0,05 względem linii podstawowej; P <0,05. (F) Indukowane wydzielanie zarówno sST2 jak i IL-33 może zmniejszać wolną IL-33. Fibroblasty w obrębie serca traktowano wskazanymi dawkami PMA przez 24 godziny w celu indukcji sST2 i IL-33. W górnych blotach kondycjonowane pożywki (20 (ll) analizowano za pomocą analizy Western. PMA zależnie od dawki zwiększało wydzielanie IL-33 i sST2. Poniżej, podłoża były preinkubowane w obecności lub nieobecności 20 .g sST2-Fc białka, a następnie inkubowane z nasyconymi perełkami przez 2 godziny. Próbki preinkubowane z sST2-Fc miały niewielką IL-33, co wskazuje, że preinkubacja z sST2-Fc usuwa wolną IL-33. PMA zależnie od dawki zmniejszała wolną IL-33 pomimo wzrostu całkowitej IL-33; dane te sugerują, że indukowany sST2 może działać jako receptor pułapkowy, zmniejszając wolną IL-33. Wysoki poziom sST2 może przewidywać gorsze rokowanie u pacjentów z układem sercowo-naczyniowym, co sugeruje, że poziomy sST2 są wystarczające do zassania endogennych poziomów IL-33. Pomimo obecnego braku informacji na temat poziomu endogennej IL-33 u ludzi, przetestowaliśmy hipotezę, że bodźce zwiększające sST2 mogą sekwencjonować niezwiązane IL-33. Gdy szczurzy noworodkowe fibroblasty w sercu były stymulowane rosnącymi dawkami PMA, indukowano zarówno sST2 jak i całkowitą IL-33 (Figura 2F). Jednak niezwiązana IL-33 zmniejszyła się, co wskazuje, że indukcja sST2 mogłaby potencjalnie ograniczyć sygnalizację IL-33 (Figura 2F). Dane te sugerują, że lokalny stosunek IL-33 i sST2 może regulować sygnalizację IL-33. IL-33 blokuje aktywację NF-kB przez angiotensynę II i fenylefrynę. Ponieważ NF-kB jest szlakiem sygnałowym powszechnym dla IL-1R / TLR, w tym IL-33 i ST2 (12), a NF-kB odgrywa rolę w przeroście mięśnia sercowego (16), badaliśmy rolę NF-y. Aktywacja B w przeciwhipertroficznym działaniu IL-33. Ilościowe analizy z 5 oddzielnych doświadczeń w kardiomiocytach (Figura 3A) i fibroblastach sercowych (Figura 3B) z lub bez angiotensyny II (1. M), fenylefryny (50. M) lub IL-33 (10 ng / ml) potwierdziły, że IL -33, angiotensyna II i fenylefryna niezależnie aktywowały NF-kB w obu typach komórek. Jednakże aktywacja NF-kB przez angiotensynę II i fenylefrynę w kardiomiocytach została osłabiona przez IL-33; efekt ten obserwowano tylko przejściowo w fibroblastach serca. Jak wykazano w analizach ilościowych z 4 oddzielnych doświadczeń na kardiomiocytach (Figura 3C) i fibroblastach sercowych (Figura 3D), indukowano angiotensynę II i IL-33 inhibitora NF-kB. (I-BB) fosforylacja w obu typach komórek, ale IL-33 zmniejszała I (B. fosforylacja w kardiomiocytach, zgodna z wynikami EMSA. Testy przejściowej transfekcji reporterowej (n = 3 myszy na grupę) także wykazały, że angiotensyna II zwiększała aktywność promotora NF-kB (66%. 26%, P <0,05, dane nie pokazane) i że współodczuwanie z IL-33 zniosło indukcję Aktywność promotora NF-kB (8%> 12%, P = NS, dane nie pokazane). Ponadto, cotreatment z sST2 uwalniał represję aktywności promotora NF-kB przez IL-33 (42%. 5%, P <0,05, dane nie pokazane). Interesujące jest to, że zarówno aktywność wiązania jądrowego NF-kB, jak i I. B. fosforylacji przez IL-33 nie obserwowano przy stymulacji za pomocą PDGF-BB (10 ng / ml) lub TNF-a (10 ng / ml), które również aktywują NF-kB (Figura 3E). Dane te wykazują podwójny charakter sygnalizacji IL-33 w kardiomiocytach, z łagodną aktywacją NF-kB, ale atenuacją NF-kB przez inne bodźce hipertroficzne. Figura 3IL-33 przejściowo aktywuje NF-kB, ale blokuje aktywację NF-kB przez bodźce przerostowe [patrz też: rehabilitacja po zerwaniu ścięgna achillesa, szpital dziecięcy lublin chodźki, produkty o niskim indeksie glikemicznym wykaz ] [przypisy: koszulki ratownictwo medyczne, tobrosopt dex, koprolalia ] [więcej w: koszulki ratownictwo medyczne, tobrosopt dex, koprolalia ]