Myszy nie posiadające cząsteczki sygnalizującej CalDAG-GEFI reprezentują model niedoboru adhezji leukocytów typu III ad 10

Liczbę toczących się leukocytów określono przez zliczenie komórek przechodzących przez prostopadłą płaszczyznę w ciągu 10 sekund. Aby określić silną przyczepność komórek, policzono liczbę leukocytów, które pozostawały w bezruchu przez ponad 30 sekund. W celu zbadania roli integryn y2 w adhezji leukocytów w tych warunkach eksperymentalnych, myszy wlewano 40. G przeciwciał hamujących anty-a2 (BD Biosciences) 15 minut przed rozpoczęciem eksperymentu i analizowano jak opisano powyżej. Zapalenie skóry Drażniące zapalenie skóry wywołano miejscowym zastosowaniem oleju krotonowego (7). Myszy znieczulono za pomocą inhalacji izofluranem, a każda strona ucha była traktowana 10 ul 2% oleju krotonowego (Sigma-Aldrich) w 4: acetonie / oleju z oliwek. Po 6 godzinach myszy uśmiercano przez przedawkowanie inhalacji halotanem. Uszy usunięto, utrwalono w 10% formalinie i zatopiono w parafinie, a skrawki wybarwiono H & E do zbadania pod mikroskopem optycznym. Zapalenie otrzewnej Myszom wstrzyknięto dootrzewnowo ml 3% tioglikolanu (Sigma-Aldrich), i płukanie otrzewnej przeprowadzono po 4 godzinach, jak opisano wcześniej (52). Liczby neutrofilów określono przez analizy morfologiczne preparatów cytokuliny barwionej Diff-Quik (VWR) przez obserwatora ślepego na genotyp. Statystyki Wyniki są podane jako średnie. SEM. Istotność statystyczną oceniano za pomocą niesparowanego dwustronnego testu t Studenta. Wartość AP mniejsza niż 0,05 została uznana za znaczącą. Uwaga dodana w dowodzie. Zwrócono naszą uwagę, że utrata ekspresji CalDAG-GEFI u 2 pacjentów z LAD-III doprowadziła do nieprawidłowej aktywacji receptora a2bb3 3 wywołanego przez receptor A białka A w płytkach krwi i nieobecności aktywacji integryny y2 w neutrofilach (R. Alon i A. Etzioni, niepublikowane obserwacje). Materiały uzupełniające Zobacz Dodatkowe dane Podziękowania Jesteśmy wdzięczni Tanya Mayadas za porady i pomocne dyskusje oraz Richardowi Hynesowi za krytyczne przeczytanie manuskryptu i porady. Dziękujemy Lesley Cowan za pomoc w przygotowaniu manuskryptu. Praca ta została sfinansowana z grantu Scientist Development od American Heart Association (do W. Bergmeiera); przez stypendium GO1360 z Deutsche Forschungsgemeinschaft (do T. Goerge); przez National Heart, Lung and the Blood Institute, NIH, przyznać R37-HL41002 (do DD Wagner); przez Narodowy Instytut Zdrowia Dziecka i Rozwoju, NIH, grant R01-HD28341 (do AM Graybiel); przez Fundację Simonsa (do AM Graybiel); i przez National Institutes of Mental Health, NIH, przyznają F32-MH065815 (do JR Crittenden). Przypisy Niestandardowe skróty: CalDAG-GEFI, Ca2 + i czynnik wymiany nukleotydu guaniny regulowany diacyloglicerolem I; fMLP, formylo-metionylleucylofenyloalanina; GEF, współczynnik wymiany nukleotydu guaniny; LAD, niedobór adhezji leukocytów; LTB4, leukotrien B4; PAF, czynnik aktywujący płytki; PAR4p, peptyd aktywujący PAR4; PSGL-1, ligand glikoproteinowy P-selektyny a 1; TG, tioglikolan. Konflikt interesów: Autorzy zadeklarowali brak konfliktu interesów. Informacje referencyjne: J. Clin. Invest.117: 1699. 1707 (2007). doi: 10,1172 / JCI30575
[więcej w: typy osobowości wg junga, różyczka objawy u dorosłych, koszt ubezpieczenia zdrowotnego ]
[przypisy: emedlink, koszulki ratownik medyczny, twardzina układowa objawy ]
[więcej w: emedlink, koszulki ratownik medyczny, twardzina układowa objawy ]