Myszy nie posiadające cząsteczki sygnalizującej CalDAG-GEFI reprezentują model niedoboru adhezji leukocytów typu III ad 6

W 40-minutowym okresie obserwacji nie pojawiły się skrzepliny u zmutowanych myszy. P <0,001. Dyskusja Stwierdziliśmy, że CalDAG-GEFI był głównym regulatorem aktywacji integryli a1, P2 i a3 na płytkach krwi i neutrofilach, zarówno in vitro, jak i in vivo. W konsekwencji, myszy pozbawione CalDAG-GEFI miały wadliwe odpowiedzi zapalne i znacznie osłabioną zdolność do tworzenia skrzeplin w odpowiedzi na uszkodzenie naczyń. Ten fenotyp jest uderzająco podobny do tego opisanego dla pacjentów z LAD-III, który łączy łagodny LAD z zaburzeniem krwawienia podobnym do Glanzmanna (9. 13). We wszystkich zgłaszanych dotychczas przypadkach kliniczne objawy LAD-III wydają się być spowodowane defektem aktywacji, ale nie ekspresją lub strukturą integryli a1, a2 i a3 na leukocytach i płytkach krwi (9). . Skuteczne leczenie pacjentów z LAD-III za pomocą przeszczepu szpiku kostnego silnie sugeruje, że defekt genetyczny leżący u podłoża tej choroby znajduje się w komórkach krwiotwórczych (9). W związku z tym spekulowano, że brak lub nieprawidłowe działanie kluczowego regulatora integryny wyrażanego w komórkach hematopoetycznych jest odpowiedzialne za fenotyp obserwowany u pacjentów z LAD-III (9). Proponujemy tutaj, że CalDAG-GEFI jest takim regulatorem i że niedobór genetyczny CalDAG-GEFI może być obecny u pacjentów z LAD-III. Podobnie jak leukocyty od pacjentów z LAD-III (10-12), neutrofile z CalDAG-GEFI2 /. myszy zachowywały się normalnie w wielu testach funkcjonalnych, w tym tworzeniu ROS, wewnątrzkomórkowym strumieniu wapnia i uwalnianiu granulek (Figura 1), co pokazuje, że komórki były w pełni zdolne do aktywowania wewnątrzkomórkowych szlaków sygnałowych. Neutrofile z niedoborem CalDAG-GEFI wykazywały prawidłowy poziom integryli a2 i PSGL-1 na powierzchni komórki, podczas gdy ekspresja powierzchniowa integryn | 3 i selektyny L była znacznie zmniejszona (Tabela 1). Obniżenie ekspresji L-selektyny było podobne do obserwowanego wcześniej u myszy z niedoborem selektyny P / E, które także wykazują defekt wynaczynienia neutrofilów (20). Tak więc może to odzwierciedlać wydalanie receptora z aktywowanych leukocytów krwi, które nie są zdolne do wynaczynienia do tkanki. Co ciekawe, zmniejszona ekspresja L-selektyny była również opisana dla leukocytów od pacjenta LAD-III (13). W wyniku ich wadliwej aktywacji integryny, neutrofile z niedoborem CalDAG-GEFI wykazywały zaburzoną odpowiedź na ostre zapalenie. W porównaniu z grupą kontrolną, znacznie mniej neutrofili z niedoborem kalafiora CalDAG-GEFI migrowało do zapalnych tkanek myszy poddanych doświadczalnemu zapaleniu otrzewnej lub zapaleniu skóry (Figura 5). Interesujące jest jednak to, że rekrutacja neutrofili w modelu zapalenia skóry została tylko częściowo zredukowana w CalDAG-GEFI. /. myszy (około 40% kontroli), podczas gdy poprzednie badania wykazały całkowite zahamowanie rekrutacji neutrofili w tym modelu w CD18. /. myszy (7). Dane te sugerują, że CalDAG-GEFI odgrywa ważną i specyficzną rolę w aktywacji integryn P2 w neutrofilach i że, przynajmniej w niektórych stanach zapalnych, inne cząsteczki sygnałowe, takie jak członkowie rodziny PKC (39, 40) lub inne Rap-GEFs (41) może służyć jako alternatywne ścieżki prowadzące do aktywacji integryny a2 w nieobecności CalDAG-GEFI. Podobnie, wcześniej wykazaliśmy silną agregację płytek z niedoborem CalDAG-GEFI . stymulowanych trombiną lub kolagenem (15). W dalszych badaniach zidentyfikowaliśmy sygnalizację przez PKC jako niezależną ścieżkę pozwalającą na aktywację. IIb. 3 w nieobecności CalDAG-GEFI (Bergmeier i wsp., Niepublikowane obserwacje). Dostarczamy obecnie dowodów na to, że CalDAG-GEFI był również krytyczny dla aktywacji integryn płytkowych (3 (Figura 6). Aktywacja integryn | 3 była prawie całkowicie hamowana w płytkach z niedoborem CalDAG-GEFI . stymulowanych ADP i analogiem tromboksanu A2 U46619, podczas gdy była ona tylko częściowo hamowana w płytkach z niedoborem CalDAG-GEFl . aktywowanych przez receptory PAR4 (Figura 6). Nasze wyniki potwierdzają obserwacje Gruner i wsp., Którzy wykazali, że integryny. ulegają ekspresji na spoczynkowych płytkach myszy w stanie niskiego powinowactwa i że wymagana jest aktywacja komórkowa, aby te integryny mogły przejść w stan wysokiego powinowactwa (34). Wcześniejsza praca z ludzkimi płytkami krwi sugerowała, że integryny. 5. i. 6. mogą ulegać konstytutywnej ekspresji w stanie wysokiego powinowactwa, ponieważ te komórki spontanicznie przywierają do fibronektyny i lamininy, odpowiednio (36, 42). Jednak w tych badaniach analizowano jedynie adhezję niestymulowanych płytek krwi i nie badano, czy aktywacja płytek jeszcze bardziej zwiększy liczbę adherentnych komórek.
[podobne: piramida zdrowego zywienia, zdrowa żywność zdrowy styl życia, street workout plan treningowy ]
[hasła pokrewne: tobrosopt dex, koprolalia, sebidin plus ]
[przypisy: tobrosopt dex, koprolalia, sebidin plus ]