Myszy nie posiadające cząsteczki sygnalizującej CalDAG-GEFI reprezentują model niedoboru adhezji leukocytów typu III ad 7

Opierając się na naszych odkryciach, że silni agoniści indukowali znaczącą aktywację integryli a1 i a3 w płytkach znokautowanych in vitro, byliśmy zaskoczeni, że niedobór CalDAG-GEFI doprowadził do całkowitego zahamowania powstawania skrzeplin tętniczych (Figura 7). Prawdopodobnie najprostszym wytłumaczeniem tego odkrycia jest to, że stężenia kolagenu i trombiny, które napotyka płytki krwi w miejscach uszkodzenia naczyń są znacznie niższe niż te używane w naszych badaniach in vitro. Alternatywnie, silny defekt przylegania płytek obserwowany w CalDAG-GEFI. /. myszy mogłyby odzwierciedlać krytyczną rolę, jaką CalDAG-GEFI odgrywa w zewnętrznym sygnalizowaniu za pomocą integryn zajętych przez ligand w płytkach krwi (43) lub, że płytki krwi z niedoborem CalDAG-GEFI . nie są zdolne do aktywowania swoich integryn w skali podsegmentowej wymaganej do skutecznej adhezji w warunki przepływu. Taki defekt został zasugerowany w przypadku leukocytów od pacjentów z LAD-III, którzy wykazali znaczny niedobór adhezji w płynie (13). Podobnie znaleźliśmy najbardziej uderzające defekty w adhezji neutrofili z niedoborem CalDAG-GEFI . in vivo niż in vitro w warunkach statycznych (Figury 3 i 4). Chociaż zaobserwowaliśmy silne defekty w adhezji płytek krwi i neutrofilów w CalDAG-GEFI. /. myszy, nie zaobserwowaliśmy spontanicznego krwawienia lub widocznych infekcji u tych myszy. Te odkrycia mogą wydawać się sprzeczne z fenotypem opisanym dla pacjentów z LAD-III, którzy mają łagodne do ciężkich powikłań krwotocznych, a także nawracające infekcje (9). Jednak u pacjentów krwawienie lub infekcja jest najprawdopodobniej spowodowana przypadkowym uszkodzeniem tkanek lub narażeniem na patogeny, wyzwaniami, które rzadko spotykają myszy trzymane w ograniczonej, wolnej od patogenów przestrzeni życiowej. Powikłania samoistnego krwawienia występują również rzadko w mysich modelach zespołu Bernarda-Souliera lub w ciężkiej trombocytopenii, natomiast silnie upośledzoną hemostazę obserwuje się w testach z krwawieniem ogonowym u tych myszy (44, 45). Mała GTPaza Rap1 została niedawno zidentyfikowana jako krytyczna cząsteczka regulująca aktywację integryny w wielu typach komórek, w tym w płytkach krwi, megakariocytach i neutrofilach (23, 24). Jednak powszechna ekspresja Rap1 i jej doniosłe znaczenie w komórkach niehematopoetycznych (23, 24) sprawiają, że jest mało prawdopodobne, aby sam Rap1 był zmutowany u pacjentów z LAD-III (9). Ponadto, ostatnie badanie przeprowadzone przez Kinashi i in. wykazał prawidłową ekspresję, ale upośledzoną aktywację Rap1 w transformowanych PBL pochodzących od pacjenta z LAD-III (46). Autorzy doszli do wniosku, że w tych komórkach wadliwa jest aktywność Rap1-GEF niezbędna do aktywacji Rap1 i integryny. Wykazaliśmy, że CalDAG-GEFI jest głównym regulatorem aktywacji integryny Rap1 i Ai i p3 w płytkach krwi (Figura 6 i odnośnik 15) i że jest również krytyczny dla aktywacji Rap1 (Figura 2) i Ai i. 2 integryny (ryc. 3 i 4) w neutrofilach. Ponadto ekspresja CalDAG-GEFI jest znacznie bardziej specyficzna względem tkanki niż Rap1 (15, 17), co może wyjaśniać, dlaczego myszy pozbawione CalDAG-GEFI nie wykazują widocznych wad podczas rozwoju embrionalnego, podczas gdy myszy pozbawione Rap1b wykazują około 85% śmiertelność embrionalna (47). Zatem CalDAG-GEFI może być wadliwym Rap-GEF w płytkach krwi i leukocytach pacjentów z LAD-III. Inne białka zaangażowane w aktywację typu inside-out więcej niż jednej rodziny integryn obejmują białka cytoszkieletu, takie jak talina lub filamina (48, 49), kinaza związana z integryną (ILK) (50) lub członkowie rodziny PKC (39, 40). ). Te białka nie są jednak ograniczone do komórek linii krwiotwórczej; w związku z tym mutacje w kodujących je genach prawdopodobnie nie są odpowiedzialne za LAD-III. Ponadto w leukocytach od pacjenta z LAD-III odnotowano prawidłową ekspresję różnych adaptorów cytoszkieletu, izoform PKC i ILK (12). Różne fenotypy zostały opisane u indywidualnych pacjentów z LAD-III (10. 13), co sugeruje, że istnieją różnice w penetracją choroby lub, że może być zaangażowany więcej niż gen. Na przykład Harris i in. (11) stwierdzili, że integryny pacjenta mają wrodzony defekt w swej awidności wiązania ligandów, których nie można było pokonać przez aktywację przeciwciał lub egzogennych kationów i że neutrofile od tego pacjenta wykazały upośledzoną odpowiedź chemotaktyczną. Takie wady nie zostały do naszej wiedzy zgłoszone przez inne grupy. Alon i in. (13) stwierdzili, że leukocyty od innego pacjenta z LAD-III wykazywały upośledzoną adhezję w warunkach przepływu fizjologicznego, ale ich przyczepność w warunkach statycznych była podobna jak w przypadku kontroli. W innych raportowanych przypadkach LAD-III stwierdzono, że przyczepność w warunkach statycznych znacznie się pogarsza (10-12)
[przypisy: twardzina układowa objawy, różyczka objawy u dorosłych, szpital dziecięcy lublin chodźki ]
[hasła pokrewne: koszulka ratownictwo medyczne, jaskółcze ziele zastosowanie, aulin ulotka ]
[więcej w: koszulka ratownictwo medyczne, jaskółcze ziele zastosowanie, aulin ulotka ]