Peptydowy inhibitor peptydu ARF FoxM1 w leczeniu raka wątrobowokomórkowego myszy ad 5

Przeciwnie, immunobarwienie p27Kip1 było przeważnie cytoplazmatyczne w zmutowanym peptydzie ARF37a44. Badania te wskazują, że peptyd WT ARF26 . jest skuteczny w zmniejszaniu funkcji FoxM1 in vivo i że akumulacja jądra białka p27Kip1 była związana ze zmniejszoną proliferacją nowotworu wątroby. Figura 4 przedstawia terapię peptydem ARF26P44 powodującą akumulację jądrową białka p27Kip1 w mysich nowotworach HCC. (A (3F) Nuklearna akumulacja białka p27Kip1 w nowotworach HCC z myszy traktowanych peptydem WT ARF26a44a i dsRNA Mx-CreFoxm1a /. myszy. Guzy wątrobowe indukowano u myszy Fox1 / fl z traktowaniem DEN / PB, a następnie traktowano codziennymi wstrzyknięciami ip 5 mg / kg masy ciała peptydu WT ARF264 (B) lub zmutowanego peptydu ARF374 (C) lub PBS (A) przez 4 tygodnie, jak opisano w legendzie z Figury 3A. (D. F) Gen Foxm1 został genetycznie usunięty w istniejących wcześniej nowotworach wątroby dsRNA Mx-CreFoxm1. /. myszy przeciw kontroli dsRNA Foxm1fl / fl i PBS Mx-CreFoxm1fl / fl jak opisano w legendzie z Ryc. 1. Skrawki nowotworu wątroby od wskazanych myszy zostały immunohistochemicznie wybarwione przeciwciałem p27Kip1. Strzałki wskazują barwienie jądrowe dla białka p27Kip1, a groty strzałek pokazują marginesy guza wątroby. Powiększenie, × 200. Peptyd WT ARF26 . 44 powoduje selektywną apoptozę komórek nowotworowych wątroby. Analiza wybarwionych H & E fragmentów nowotworu wątroby od myszy traktowanych peptydem WT ARF26 . ujawniła, że wiele gruczolaków wątrobowych i komórek nowotworowych HCC zabarwiło się na czerwono i wykazywało przerwanie błony jądrowej, co wskazuje na apoptozę (Figura 5, A. F ). Te czerwone komórki barwiące nie zostały znalezione ani w otaczającej normalnej tkance wątroby (Figura 5, A (3F), ani w guzach wątroby od myszy traktowanych albo zmutowanym peptydem ARF374P4, albo PBS (Figura 5, GHL). Ponadto, te apoptotyczne komórki nowotworowe nie były widoczne w niedoborach wątroby w dsRNA CKO Mx-CreFoxm1. /. myszy (Figura 1, E. G), odkrycie zgodne z naszymi poprzednimi badaniami nowotworowymi za pomocą Alb-CreFoxm1. /. wątróbki (8). Figura 5H i E-barwione nowotwory wątroby od myszy traktowanych peptydem WT ARF264. Guzy wątrobowe indukowano u myszy Foxm1fl / fl z zastosowaniem DEN / PB, a następnie poddawano im codzienne iniekcje ip 5 mg / kg masy ciała peptydu WT ARF26 . 44 lub zmutowanego peptydu ARF374 przez 4 lub 8 tygodni (zob. Rycina 2A legenda). Strzałki wskazują, że czerwone komórki barwiące przechodzą apoptozę, a groty strzałek pokazują marginesy guza wątroby. (A (35F) Sekcje nowotworu wątroby barwione H & E z myszy traktowanych peptydem WT ARF26a45 wykazały, że wiele gruczolaków wątrobowych i komórek nowotworowych HCC zabarwiło się na czerwono i zaokrąglono w górę, co wskazuje na apoptozę. E i F są obrazami C i D. o większym powiększeniu. Nie znaleziono komórek apoptotycznych odbarwiania czerwonego w otaczającej, prawidłowej tkance wątrobowej lub w guzach wątroby od dsRNA CKO Mx-Cre Foxm1. /. myszy (patrz Figura 1, E. G). (G . L) Nie znaleziono komórek nowotworowych zabarwionych na czerwono w skrawkach nowotworowych wątroby wybarwionych H & E od myszy traktowanych PBS lub zmutowanym peptydem ARF374. Powiększenie, x 200 (A (D i G . L); × 400 (E i F). Zastosowaliśmy test TUNEL oparty na fluorescencji, aby określić, że mysie komórki HCC traktowane peptydem WT ARF26 . wykazywały znaczący, 22% wzrost apoptozy (Figura 6, A, B i E). Przeciwnie, bardzo niewiele apoptotycznych komórek HCC znaleziono po leczeniu zmutowanym peptydem ARF374 lub PBS (Figura 6, C = E). Immunobarwienie skrawków wątroby z proteolitycznie ciętym aktywowanym białkiem kaspazy-3 potwierdziło tę selektywną apoptozę mysich komórek HCC traktowanych peptydem WT ARF264 bez barwienia proapoptotycznego w sąsiadującej normalnej tkance wątroby (Figura 6, FłH). Te badania pokazują, że peptyd WT ARF selektywnie indukuje apoptozę komórek HCC bez uszkadzania sąsiadujących normalnych hepatocytów. Fig. 6WT peptyd ARF26a wywołuje selektywną apoptozę mysiego HCC. (A (D) Skrawki raka wątroby wybarwiono na komórki apoptotyczne, stosując test TUNEL. Myszy traktowane peptydem WT ARF264 przez 4 lub 8 tygodni wykazywały znaczący wzrost apoptozy komórek nowotworowych, o czym świadczyło barwienie TUNEL-dodatnie (zielona fluorescencja, wskazana białymi strzałkami), podczas gdy zmutowany peptyd ARF37a44. lub myszy traktowane PBS wykazały bardzo niewiele komórek apoptotycznych w nowotworach HCC. (E) Oznaczenie ilościowe komórek barwiących TUNEL-dodatnich. Potrójne gwiazdki oznaczają statystycznie istotną zmianę na poziomie *** P. 0,001. (FHH) Selektywna apoptoza jest wykrywana w komórkach nowotworowych HCC u myszy traktowanych peptydem WT ARF264 przez immunobarwienie specyficznym przeciwciałem dla proteolitycznie ciętego aktywowanego białka kaspazy-3.
[hasła pokrewne: colgate max white one active, objawy głodu alkoholowego, piramida zdrowego zywienia ]
[podobne: tobrosopt dex, koprolalia, sebidin plus ]
[więcej w: tobrosopt dex, koprolalia, sebidin plus ]