Peptydowy inhibitor peptydu ARF FoxM1 w leczeniu raka wątrobowokomórkowego myszy ad 6

Wcześniej wykazaliśmy, że supresor guza ARF celuje w białko FoxM1b w jądro i hamuje jego funkcję transkrypcyjną (8). Ponadto wykazaliśmy, że zwiększona ekspresja cDNA ludzkiego FoxM1b u myszy Rosa26-FoxM1b Tg (34) stymulowała rozwój i progresję nowotworów prostaty u myszy TRAMP / Rosa26-FoxM1b i LADY / Rosa26-FoxM1b podwójnych Tg (35). Aby opracować nowy genetyczny model HCC, który jest silnie zależny od czynnika transkrypcyjnego FoxM1b, przeszliśmy mysz rasy Rosa26-FoxM1b Tg do Arf. /. tło myszy. Po 33 tygodniach leczenia DEN / PB, myszy Arfc / A Rosa26-FoxM1b Tg rozwinęły wysoce proliferacyjne HCC, a ich komórki HCC wykazały szybkość proliferacji 6 000 komórek BrdU-dodatnich na nowotwór na milimetrach kwadratowych (Figura 7J), która wynosi około 30 -krotnie większe niż obserwowane w HCC indukowanych DEN / PB u myszy WT (Figura 3K, 200 komórek pozytywnych pod względem BrdU na nowotwór mm2). Traktowane DEN / PB-traktowane wątrobę Arf. /. Rosa26-FoxM1b Tg również wykazywały rozwój martwicy i zwłóknienia / marskości (dane nie pokazane). Te myszy z nowotworami HCC niosącymi ArFa / ą Rosa26-FoxM1b Tg poddawano codziennemu traktowaniu peptydem WT ARF26 . 44 lub zmutowanym peptydem ARF374 przez 4 tygodnie. U myszy Arfc / A Rosa26-FoxM1b Tg, terapia peptydem WT ARF26P spowodowała znaczącą, 84% redukcję znakowania BrdU komórek HCC w porównaniu z traktowaniem tych myszy zmutowanym peptydem ARF374 lub PBS (figura 7, ACHC i J). Czerwono-barwiące komórki HCC z przerwaniem błony jądrowej wskazujące na apoptozę znaleziono w odcinkach guza wątroby zabarwionych H & E od myszy Arfa / p Rosa26-FoxM1b Tg traktowanych peptydem WT ARF264, ale nie od tych leczonych mutantem ARF37a. peptyd lub PBS (figura 7, D. F). W teście TUNEL opartym na fluorescencji ustalono, że komórki Ar HC3 / A Rosa26-FoxMlb Tg HCC traktowane peptydem WT ARF26 . wykazywały 42% wzrost apoptozy (Figura 7K), który był dwukrotnie wyższy niż w nowotworach wątroby z Myszy WT (Figura 6E). Ponadto, komórki TUNEL-dodatnie były ograniczone do regionu HCC (białe groty strzałek) i nie zostały wykryte w sąsiadującej prawidłowej tkance wątroby (Figura 7I). Przeciwnie, bardzo niewiele apoptotycznych komórek HCC znaleziono po leczeniu myszami Arfpp / Fox Rosa-Tb ze zmutowanym peptydem ARF374 lub PBS (Figura 7, G, H i K). Te badania nowotworów wątroby w Arfpl / Rosa26-FoxMlb Tg wykazują, że peptyd WT ARF26 . jest skuteczny w zmniejszaniu znakowania BrdU wysoko proliferujących komórek HCC i selektywnie indukuje apoptozę komórek HCC u tych myszy bez uszkadzania sąsiedniej prawidłowej tkanki wątroby. Rycina 7WT ARF26a traktuje peptydem zmniejszenie proliferacji i zwiększa apoptozę HCC, które indukowano u myszy Arfpc / Rosa Rosa-FoxMlb Tg przez DEN / PB. Wysoce proliferacyjne nowotwory HCC indukowano u myszy Arfpc / Rosa Rosa-FoxMlb Tg po 33 tygodniach leczenia DEN / PB. Myszy Arfpc / Rosa26-FoxMlb Tg otrzymywały codzienne iniekcje ip peptydu WT ARF26S (inhibitor funkcji FoxM1) lub zmutowanego peptydu ARF37a44 lub PBS przez 4 tygodnie. (A (C) Sekcje nowotworu wątroby poddano barwieniu immunohistochemicznemu monoklonalnym przeciwciałem BrdU w celu określenia proliferacji HCC. Skrawki nowotworu wątroby histologicznie wybarwiono H & E (D i E) w celu zidentyfikowania czerwonych komórek apoptotycznych lub wybarwiono do apoptozy za pomocą testu TUNEL (G. I). Czarne groty wskazują granice guza HCC, a białe groty strzałek (I) wskazują granicę regionu HCC. (J) Policzyliśmy komórki BrdU-dodatnie w HCC i wykorzystaliśmy te informacje do obliczenia liczby komórek BrdU-dodatnich na milimetrową tkankę guza wątroby wątroby (. SD). (K) Policzyliśmy komórki TUNEL-dodatnie w HCC i wykorzystaliśmy te informacje do obliczenia procentowej apoptozy HCC (. SD). Wartości P obliczone w teście studenta: *** P. 0,001. Powiększenie: x 200 (A = F); × 100 (G. I). Peptyd WT ARF26 . hamuje angiogenezę regionu HCC. Angiogeneza ma kluczowe znaczenie dla pośredniczenia w rozwoju HCC, a komórki śródbłonkowe nowych naczyń włosowatych HCC wykazują ekspresję białka CD34 (39. 41). Występowało znaczące barwienie CD34 w komórkach śródbłonka w regionach HCC w PBS lub zmutowanych myszach traktowanych peptydem ARF37a45 (Figura 8, A i B) i od dsRNA CKO Mx-CreFoxml. /. myszy (Figura 8D). Przeciwnie, ekspresja białka CD34 nie została wykryta w regionie HCC z myszy traktowanych peptydem WT ARF26a45 (Figura 8C).
[patrz też: kalafior wartości odżywcze, piramida zdrowego zywienia, jaskółcze ziele zastosowanie ]
[patrz też: koszulka ratownictwo medyczne, jaskółcze ziele zastosowanie, aulin ulotka ]
[podobne: koszulka ratownictwo medyczne, jaskółcze ziele zastosowanie, aulin ulotka ]