Peptydowy inhibitor peptydu ARF FoxM1 w leczeniu raka wątrobowokomórkowego myszy ad 9

Określiliśmy również krzywą wzrostu komórek HepG2 w 1, 2 lub 3 dni po traktowaniu peptydem WT ARF264, zmutowanym peptydem ARF374 lub PBS. Chociaż komórki HepG2 traktowane peptydem WF ARF26A4 wykazywały 50% apoptozę (Figura 9E), były zdolne do podtrzymania liczby początkowo pokrytych komórek (2×105), co sugeruje, że komórki traktowane peptydem WT ARFp mogły postępować przez cykl komórkowy (Figura 9J). Wyniki te są zgodne z ostatnimi badaniami, w których hipomorficzne poziomy białka FoxM1 (40% poziomów WT FoxM1) w liniach komórkowych raka sutka transfekowanych innym dupleksem siRNA Foxm1 zmniejszały ekspresję regulatorów mitotycznych do poziomów, które są niewystarczające do prawidłowego wykonania mitozy, prowadząc do do katastrofy mitotycznej i apoptozy (63). Na podstawie tych wyników proponujemy hipotezę, że leczenie peptydem WT ARF26P4 powoduje hipomorficzne poziomy aktywności FoxM1, prowadząc do apoptozy, podczas gdy zubożanie poziomów FoxM1 powoduje zatrzymanie mitotyczne. Jednak nie wykluczyliśmy innych możliwości. Dyskusja Pacjenci z HCC mają słabe prognozy, ponieważ późne wykrycie i wysoka częstotliwość nawrotu nowotworu sprawiają, że obecna terapia HCC jest nieskuteczna (1). Jednym z potencjalnie leczniczych podejść w terapii HCC jest interferowanie z progresją HCC poprzez blokowanie podziału komórek i selektywne indukowanie apoptozy komórek nowotworowych. W tym badaniu wykazaliśmy, że FoxM1 jest wymagany do proliferacji mysich komórek raka wątroby podczas progresji guza. W celu farmakologicznego zmniejszenia in vivo aktywności FoxM1 w HCC myszy poddawano codziennym iniekcjom za pomocą peptydowego inhibitora funkcji FoxM1 penetrującego komórki ARF26 .. Po 4 tygodniach leczenia peptydem ARF, białko FoxM1 było częściowo zlokalizowane w jąderku komórek HCC, i te wątrobowe komórki nowotworowe wykazywały zmniejszoną proliferację i angiogenezę z selektywną indukcją apoptozy HCC (Figura 9K). Zmniejszona proliferacja komórek nowotworowych u pacjentów z niedoborem Foxm1 i nowotworami traktowanymi peptydem WF ARF264 była związana z akumulacją jądrową białka pIKKip CDKI, o którym wiadomo, że negatywnie reguluje proliferację komórek HCC w modelach mysiego raka wątroby (64). Przeciwnie, myszy leczone peptydem ARF37 . penetrującym komórki, które nie mają sekwencji ARF wymaganych do interakcji z białkiem FoxM1 (8), nie zmieniły lokalizacji jądrowej białka FoxM1 i nie wpłynęły na proliferację, apoptozę lub angiogenezę. komórek HCC. Nasze obecne badania pokazują, że leczenie peptydem WT ARF26 . skutecznie zmniejsza proliferację i indukuje apoptozę komórek HCC przez zmniejszenie funkcji FoxM1 in vivo. W celu opracowania nowego genetycznego modelu HCC, który jest silnie zależny od czynnika transkrypcyjnego FoxM1b, przeszliśmy przez myszy Rosa26-FoxM1b Tg, które wszędzie eksprymowały transgen cDNA ludzkiego FoxM1b (34), do Arf. /. tło myszy. Zastosowanie myszy Arfpl / Rosa26-FoxM1b Tg umożliwiło nadekspresję białka FoxM1b i wyeliminowało zahamowanie supresji guza ARF białka FoxM1b. Po 33 tygodniach leczenia DEN / PB myszy Arfc / A Rosa26-FoxM1b Tg wykazywały wysoce proliferacyjne komórki HCC, które wykazywały około 30-krotnie więcej inkorporacji BrdU niż te, które znaleziono u myszy WT, u których nowotwory wątroby indukowano za pomocą ekspozycji DEN / PB. Po 4 tygodniach leczenia peptydem WT ARF26 ., myszy Arfp / A Rosa26-FoxM1b Tg wykazywały znaczącą redukcję inkorporacji BrdU, a apoptozę indukowano w dwukrotnie większej liczbie komórek HCC. Wyniki sugerują, że te wysoce proliferacyjne guzy wątroby ze zwiększonym poziomem białka FoxM1b są bardziej podatne na apoptozę indukowaną peptydem WT ARF26a45 i wykazują zmniejszoną proliferację komórek HCC. Zwiększona ekspresja antyapoptotycznego białka surwiwiny w ludzkim HCC i w stadium II raka jelita grubego koreluje ze zmniejszoną apoptozą, słabym wynikiem pacjenta i nawrotem guza po leczeniu (46. 48). Wiadomo, że proliferujące komórki nowotworowe konstytutywnie wyrażają wysokie poziomy regulatorów mitotycznych PLK1, kinazę Aurora B i białka surwiwiny, podczas gdy prawidłowe komórki eksprymują tylko te białka w fazie G2 i mitozie. Eksperymenty, które zmniejszały ekspresję tych mitotycznych regulatorów za pomocą transfekcji siRNA lub zmniejszały ich aktywność specyficznymi inhibitorami kinazy, powodowały wzmożoną apoptozę i zmniejszony wzrost komórek rakowych (45, 48, 56. 62). Stwierdziliśmy, że regiony HCC i komórki HepG2 wyrażały wysokie poziomy PLK1, kinazy Aurora B i surwiwiny, z których wszystkie są genami docelowymi transkrypcji FoxM1 (26). Poprzednie badania wykazały, że Foxm1. /. mysie zarodkowe fibroblasty lub zubożone w FoxM1 komórki U2OS zostały zablokowane w progresji mitotycznej, nie uległy apoptozie i były związane z niewykrywalnymi poziomami PLK1, kinazy Aurora B i surwiwiny (26)
[więcej w: objawy głodu alkoholowego, ibum forte ulotka, produkty o niskim indeksie glikemicznym wykaz ]
[więcej w: dicortineff ulotka, ibum forte ulotka, szpital dziecięcy lublin chodźki ]
[więcej w: dicortineff ulotka, ibum forte ulotka, szpital dziecięcy lublin chodźki ]