Podwyższone w okresie dojrzewania 1 (EAP1) jest nowym regulatorem transkrypcji żeńskiej neuroendokrynnej osi rozrodczej ad 6

Szczury z knockdowniem EAP1 również nie przechodziły normalnego cyklu, wykazując przedłużone epizody w rui i zmniejszony hormon luteinizujący w osoczu (LH), hormon folikulotropowy (FSH) i poziomy estradiolu. Te niedobory hormonalne towarzyszyły opóźnionemu wzrostowi pęcherzyków jajnikowych, o czym świadczy nagromadzenie pęcherzyków antralnych (Figura 7A). Bardziej szczegółowa analiza wyników ujawniła, że ta kumulacja była spowodowana zwiększoną liczbą pęcherzyków o średniej wielkości (200. 400. M) u szczurów wstrzykniętych E1i1-shl. W porównaniu ze zwierzętami kontrolnymi (Figura 7B). Niespodziewanie, jajniki ze wstrzykniętych EAP1 shlp zawierały również duże torbiele pęcherzykowe i lutealne (figura 7, D i E), 2 nieprawidłowe struktury, które nie były obecne u szczurów, którym wstrzyknięto lewy eGFPa (figura 7C). Rycina 6 Ograniczone przez shRNA geny EAP1 kierowane do szczurzego POA opóźniają dojrzewanie płciowe, zaburzają cykliczność estrową i zmniejszają poziomy gonadotropiny i estradiolu w osoczu. Zwierzęta z knockdownem EAP1 wykazują: opóźnione dojrzewanie, oceniane na podstawie wieku pierwszej owulacji (A); zakłócenie cykliczności estrowej, określone w codziennych wypryskach pochwy (B i C, przykład przerwanego cyklu); epizody uporczywej rui (D); obniżone poziomy LH (E) w surowicy, FSH (F) i estradiolu (G). Liczby powyżej słupków przedstawiają liczbę zwierząt na grupę, a słupki błędu to SEM. * P <0,05, ** P <0,02 i *** P <0,01 względem kontrolnych wstrzykniętych LG eGFPa. Ryc. 7 Ograniczone shRNA, w którym pośredniczy shRNA genu EAP1 skierowane do szczurzego POA, prowadzi do nieprawidłowego rozwoju pęcherzyków. (A) Normalny wzrost pęcherzyka jajnikowego zostaje przerwany, o czym świadczy nagromadzenie pęcherzyków antralnych. (B) Akumulacja wynika z większej liczby średnich pęcherzyków antralnych w zakresie od 200 do 400 .m. (C) Przykład jajnika od kontrolnego szczura, którym wstrzyknięto eGFPa LV wykazujący prawidłowy dopełniacz pęcherzyków antralnych (AF) i ciałek żółtych (CL). (D) Jajniki z wstrzykniętych EAP1 shlp szczurów wykazywały torbiele pęcherzykowe i lutealne (odpowiednio FC i LC). (E) Wyższy widok powiększenia D. Każdy słupek reprezentuje średnią. SEM 3 zwierząt. * P <0,05 w porównaniu do kontrolnych wstrzykniętych LV eGFPa. Następnie ustaliliśmy, czy ekspresja EAP1 jest regulowana przez sygnały hormonalne o obwodowym pochodzeniu zaangażowane w kontrolę funkcji rozrodczych. W serii eksperymentów (dane niepokazane), stwierdziliśmy, że ani hormonalny poziom mRNA EAP1, ani aktywność transkrypcyjna genu EAP1 nie jest zwiększana przez steroidy jajników. Następnie ocenialiśmy poziomy mRNA EAP1 w MBH u myszy ob / ob dorosłych (80-dniowych) (uwaga dodatkowa 2). Tym zwierzętom brakuje leptyny, hormonu pochodzącego z adipocytów, który wcześniej był zaangażowany w ułatwianie dojrzewania płciowego (31) i był znany jako sygnał metaboliczny dla układu rozrodczego (32). Wyniki pokazały, że obfitość mRNA EAP1 jest niezaburzona w nieobecności leptyny (Suplementowa Figura 3). Tak więc wydaje się, że okresowa aktywacja podwzgórzowego ekspresji EAP1 wynika z wydarzeń powstałych centralnie. Dyskusja Znaczna część literatury dała jasno do zrozumienia, że żadna wyizolowana ścieżka lub podzbiór komórkowy nie jest wyłącznie odpowiedzialna za kontrolę neuroendokrynną okresu dojrzewania i późniejszą cykliczną, powtarzalną aktywację osi podwzgórze-przysadka-jajnik. Zamiast tego, kontrola ta jest prawdopodobnie wywierana przez uporządkowane hierarchiczne sieci regulatorowe. Wydaje się również, że osiągnięcie dojrzałości płciowej zależy od wiernej realizacji genetycznie kontrolowanego programu rozwojowego wymagającego dwukierunkowej komunikacji komórkowej. Czy od dawna podejrzewa się tę koncepcję. ale wciąż nieudowodnione. istnienie górnych genów kontrolujących na poziomie podrzędnym geny transkrypcji wymaganych do produktywnej interakcji neuronalnych i glejowych podzbiorów zaangażowanych w kontrolę neuroendokrynną funkcji rozrodczej. Do tej pory próby odpowiedzi na to pytanie były hamowane przez niedostatek informacji dostarczanych przez nasze obecne podejścia redukcjonistyczne, ale przede wszystkim ze względu na niedostępność odpowiedniej technologii. Korzystając z kombinacji macierzy DNA i technologii siRNA, zidentyfikowaliśmy EAP1, gen o nieznanej dotąd funkcji, jako nowy składnik mechanizmu transkrypcyjnego, który reguluje funkcję reprodukcyjną żeń-cy. EAP1 zachowuje się jak inne unikalne regulatory transkrypcji, takie jak wzmacniacz polycomb, które wykazują aktywność transaktywacyjną lub represyjną, w zależności od promotora docelowego i zaangażowanych partnerów (33). [hasła pokrewne: szpital dziecięcy lublin chodźki, jaskółcze ziele zastosowanie, zdrowa żywność zdrowy styl życia ] [przypisy: lek doreta, dieta przy dnie moczanowej tabela, aspargin ulotka ] [hasła pokrewne: lek doreta, dieta przy dnie moczanowej tabela, aspargin ulotka ]