Podwyższone w okresie dojrzewania 1 (EAP1) jest nowym regulatorem transkrypcji żeńskiej neuroendokrynnej osi rozrodczej ad

Wybraliśmy C14ORF4 do dalszych badań z powodu wcześniejszych ustaleń wykazujących, że nieprawidłowości w regionie, w którym C14ORF4 znajduje się w chromosomie 14 (14q23 <14q32) są niezmiennie związane z przedwczesnym dojrzewaniem u ludzi. C14ORF4 znajduje się w 14q24.3. Nasze wyniki pokazują, że C14ORF4, obecnie przemianowany na EAP1 (patrz poniżej), jest czynnikiem transkrypcyjnym, który działając w neuronalnych sieciach mózgu neuroendokrynnego jest wymagany do terminowego rozpoczęcia dojrzewania płciowego kobiet i utrzymania cykliczności reprodukcyjnej u kobiet. Wyniki Aby zidentyfikować geny, które mogą być zaangażowane w kontrolę transkrypcyjną dojrzewania naczelnych, wykorzystaliśmy mikromacierze DNA (Supplemental Note 1, materiał uzupełniający dostępny online w tym artykule: doi: 10.1172 / JCI31752DS1) oraz RNA z MBH i kory mózgowej (CTX) samic małp rezus w 3 różnych stadiach rozwojowych: młodociany (od 9 miesięcy do 1,8 roku życia), wczesny okres dojrzewania płciowego (2. 2,9 lat) i średni okres dojrzewania (3,1. 4 lat). Zwierzęta klasyfikowano na każdym z tych etapów, stosując kryteria opisane w Metodach. Wśród genów, których ekspresja wzrosła w MBH, ale nie w CTX, we wczesnym okresie dojrzewania i dalej w okresie dojrzewania, zidentyfikowaliśmy gen (Figura 1A) tymczasowo nazwany C14ORF4 (16). C14ORF4 jest intronless genem, który mapuje do ludzkiego chromosomu 14, q24.3 (16), regionu znajdującego się w znanym. Hotspot. dla ludzkiej pre-krycia seksualnego (17, 18). Stosując PCR w czasie rzeczywistym (Supplemental Note 2), potwierdziliśmy, że wzrost liczby podwzgórzowych C14ORF4 w podwzgórzu jest wykrywany przez macierze (Figura 1B) i ustalono, że taki wzrost nie występuje w CTX, regionie mózgu niezwiązanym z kontrolą neuroendokrynną okres dojrzewania (Figura 1C). Zawartość mRNA C14ORF4 w CTX była już na dojrzałych poziomach u młodych zwierząt, co sugeruje, że zmiany rozwojowe ekspresji C14ORF4 w tym regionie mózgu są kompletne na długo przed osiągnięciem dojrzałości płciowej, niezależnie od etapu dojrzewania płciowego. Figura Obfitość mRNA eAP1 u naczelnych innych niż człowiek i podwzgórza szczura w momencie dojrzewania. (A) Wzrost treści mRNA EAP1 związany z dojrzewaniem w podwzgórzu samic małp rezus wykrytych przy użyciu ludzkich mikromacierzy cDNA. Zmiany zawartości mRNA wyrażono jako wzrost krotności w stosunku do wartości obecnych w przedubojowym nieletnim (Juv) zwierzętach. EP, wczesne dojrzewanie; MP, w połowie dojrzewania. (B) Zwiększenie obfitości mRNA EAP1 w MBH samic małp rezus w momencie dojrzewania, jak oceniono za pomocą PCR w czasie rzeczywistym. (C) Zawartość mRNA EAP1 nie zwiększa się w CTX. *** P <0,01 względem kontroli Juv. (D) Obfitość mRNA kodującego homolog EAP1 CAB45750 nie zmienia się w MBH w momencie dojrzewania. Zawartość mRNA EAP1 wzrasta w MBH (E), ale nie w CTX (F) samic szczura w momencie dojrzewania, co oceniono za pomocą półilościowego PCR. Liczby powyżej słupków przedstawiają liczbę zwierząt na grupę, a słupki błędu to SEM. ** P <0.02 w porównaniu do kontroli Juv. Wypełnione kółka w A reprezentują zakres wartości zgłaszanych w 2 mikromacierzach i następnie zostały użyte do porównania zwierząt EP i MP z grupą Juv; otwarte kółka w panelu C przedstawiają indywidualne wartości tylko dwóch zwierząt użytych w tej grupie. Ludzki C14ORF4 koduje przewidywane białko, które ma około 40% homologii z hipotetycznym białkiem CAB45750. Nie zaobserwowano żadnych zmian w ekspresji CAB45750 w podwzgórzu małp (Figura 1D), co wskazuje, że oprócz swoistości regionalnej, wzrost liczebności mRNA C14ORF4 jest również swoisty dla genu. Ekspresja C14ORF1 (NM_007176), innego przewidywanego mapowania genów na chromosomie 14q24, nie zmieniała się w okresie dojrzewania, jak oceniano za pomocą zarówno macierzy DNA, jak i PCR w czasie rzeczywistym (dane nie przedstawione). Podobnie jak samice małp, samice szczurów w okresie dojrzewania wykazywały wzrost ilości mRNA podwzgórzowego, ale nie CTX, C14ORF4 (odpowiednio, Figura 1, E i F). Wzrost ten rozpoczął się we wczesnym okresie dojrzewania (30. 35 dni życia) i, jak u małp, stał się wyraźnie widoczny w okresie dojrzewania (32. 37 dni życia). Wczesne dojrzewanie płciowe odpowiada wcześniej opisanej wczesnej, proestralnej fazie dojrzewania, etapowi rozwojowemu, podczas którego pierwsze manifestacje zwiększonego wydzielania estrogenów stają się widoczne u samic szczura (2). Dojrzewanie w połowie odpowiada późnej fazie proestrycznej, która jest dniem pierwszego przedowulacyjnego wzrostu gonadotropin. Chociaż dojrzewanie u szczura jest bardzo skompresowanym procesem, uważamy, że ten etap jest w połowie dojrzewania, ponieważ zakończenie zmian pokwitania, o których świadczy pierwsza owulacja, nie występuje aż do następnego dnia (patrz Metody dla kryteriów włączenia) [przypisy: piramida zdrowego zywienia, badanie psychotechniczne, szpital dziecięcy lublin chodźki ] [podobne: jaskółcze ziele zastosowanie, aulin ulotka, przeziernosc karkowa ] [hasła pokrewne: jaskółcze ziele zastosowanie, aulin ulotka, przeziernosc karkowa ]