Proteolityczne przetwarzanie dynaminy przez cytoplazmatyczną katepsynę L jest mechanizmem białkowo-nerkowej choroby nerek ad 8

Dane te dowodzą, że całkowite zniszczenie dynaminy nie musi koniecznie powodować niewydolności nerek. Intrygujące jest, że miejsce rozszczepienia CatL jest wysoce konserwatywne wśród członków rodziny dynamin (Figura 4A), a jego dostępność jest tłumiona przez oligomeryzację dynaminową. Co więcej, cytoplazmatyczny CatL celuje tylko w dynaminową formę związaną z GTP, co oznacza, że tylko część dynaminy jest rozszczepiana in vivo. Nasze poprzednie eksperymenty wskazują, że dynamin: GTP jest aktywną postacią enzymu (19, 26), więc kusi nas spekulować, że CatL funkcjonuje, aby wyłączyć dynamin w sposób podobny do wyniku samodzielnego złożenia dynaminu. Pozostaje sprawdzić, czy ten nowy mechanizm wyłączania jest kiedykolwiek używany podczas normalnej fizjologii komórki. EM ujawnił 2 populacje aktyny w FP podocytów; jednym z nich jest wiązka aktyny przebiegająca powyżej poziomu przepony szczelinowej, a druga to sieć kory mózgowej położona poniżej plasmalemmy (27). Nasze dane pokazują, że dynamin kolokatyzuje się z obiema tymi populacjami (Figura 3B). Wydaje się, że FP mają molekularny skład dla stałego przegrupowania morfologicznego w celu dostosowania filtracji kłębuszkowej. To kształtowanie błony jest najprawdopodobniej spowodowane szybkimi zmianami w sieci aktyny (28), a nasze badanie sugeruje, że wymaga funkcjonalnej dynaminy. Na jego końcu C dynamin zawiera domenę bogatą w prolinę-argininę (PRD), która wiąże się bezpośrednio z domenami homologii Src 3 (SH3) z wieloma białkami, z których niektóre są białkami regulującymi aktynę lub wiążącymi, w tym profiliną, Nck, Grb2, syndapin, intersectin, cortactin, mABP1 i tuba (recenzja w odnośniku 13). To przez te interakcje uważa się, że dynamin koordynuje przemodelowywanie błony i dynamikę filamentów aktyny podczas endocytozy, morfogenezy komórek i migracji komórek. Pomimo tych powiązań pomiędzy dynaminą i aktyną, wciąż nie jest jasne, jak dokładnie dynamin reguluje dynamikę aktyny. Nasze wyniki identyfikują podocyty, z ich złożoną dynamiką aktynową, jako odpowiedni rodzaj komórek do badania zależności między rolą dynaminy w endocytozie a jej zdolnością do regulowania cytoszkieletu aktynowego. Rzeczywiście, tworzenie cytoszkieletu z kory mózgowej w komórkach eksprymujących dynK44A lub p40 lub które zostały potraktowane LPS (Figura 6B) może wynikać z hamowania endocytozy, nieprawidłowej regulacji dynamiki aktyny lub obu. Podczas gdy obecnie nie mamy bezpośrednich dowodów na bezpośredni związek między aktyną a dynaminą, dodanie LPS nie hamuje endocytozy w hodowanych podocytach (Suplementowa Figura 6), co sugeruje, że utrata endocytozy jako taka nie jest wystarczająca do wytworzenia sieci aktyny kory. Zgodnie z tym wnioskiem przeprowadzono eksperymenty pokazujące, że ekspresja znanego inhibitora endocytozy, dominującej negatywnej AuksylinyH875Q (29), upośledzona endocytoza w takim samym stopniu jak dynK44A (Suplementowa Figura 6A), jednak nie zmieniła morfologii aktyny (dodatkowa Figura 6B) . Ponadto, niezróżnicowane podocyty zawierały głównie aktynę korową (Suplementowa Figura 6B), ale wykazywały poziomy endocytozy WT (Suplementowa Figura 6A). Podsumowując, wydaje się, że nie ma korelacji między poziomami endocytozy i dynamiki aktyny w podocytach, co zwiększa prawdopodobieństwo, że mutanty dynaminowe mogą działać przede wszystkim na dynamikę aktyny podocytów. Wniosek ten jest również zgodny z obserwacją, że CatL zmniejszył endogenną dynaminę jedynie o 30% (Figura 3D), prawdopodobnie utrzymując rolę dynaminy w endocytozie. Niezależnie od tych obserwacji, dynamin jest wyraźnie obecny w jamach pokrytych klatryną na podocytach (Figura 3A), a zmiany w endocytozie są związane z pewnymi postaciami niewydolności podocytów (30). Oczywiście, potrzeba więcej pracy, aby określić dokładną rolę dyniny w podocytach. Białkomocz został rozdzielony przez ekspresję dynR725A, dynL356Q i do pewnego stopnia dynWT. Podczas gdy nasze badania pokazują, że dynamin jest skutecznie dostarczany i wyrażany w podocytach, jest mało prawdopodobne, że każdy podocyt otrzyma dynaminę. Proponujemy, że uszkodzone podocyty mogą być szczególnie podatne na wychwytywanie DNA prezentowanego w polimerach (8,31). Ewentualnie można sobie wyobrazić, że wpływ dynaminowej genu dostarcza wielu efektów w podocytach. Na przykład wydaje się możliwe, że odbudowa aktyny podocytów ma zbawienny wpływ na funkcję przepony szczelinowej. W końcu, dostarczana z genem dynamina w podocytach może mieć wpływ niezwiązany z komórkami komórkowymi na inne rezydentne komórki kłębuszkowe, takie jak kłębuszkowe komórki śródbłonka. Bez względu na dokładny mechanizm, użycie mutantów dynamin jako leczenia choroby nerek u ludzi jest atrakcyjnym przedmiotem do przyszłych eksperymentów. Metody Komórki, przeciwciała, odczynniki i standardowe techniki
[patrz też: różyczka objawy u dorosłych, co dziś zjem na śniadanie, koszt ubezpieczenia zdrowotnego ]
[przypisy: twardzina układowa objawy, vegantalgin, lek doreta ]
[więcej w: twardzina układowa objawy, vegantalgin, lek doreta ]