ROS generowane przez pyłek oksydazy NADPH dostarczają sygnału, który zwiększa indukowane antygenem alergiczne zapalenie dróg oddechowych ad 6

Odkrycia te wskazują, że indukowany stresem oksydacyjnym sygnał rekrutuje neutrofile do płuc niezależne od adaptacyjnej odpowiedzi immunologicznej. Ponieważ główną cechą sygnału jest GSSG i tworzenie 4-HNE w płynie do wyłożenia dróg oddechowych (Figura 3, A i B), zbadaliśmy udział tych produktów stresu oksydacyjnego w indukcji rekrutacji neutrofili. Podejście myszy naiwnych do nietoksycznych stężeń GSSG i 4-HNE indukowało 3- do 4-krotną rekrutację neutrofili i całkowitych komórek zapalnych w porównaniu z prowokacją PBS (figura 7, B i C). Traktowanie hodowanych komórek A549 GSSG i 4-HNE szybko (w ciągu 5 minut) wywołało fosforylację tyrozyny p38 MAPK (Figura 7D) i późniejsze wytwarzanie IL-8 (Figura 7E). Przeprowadzono również test genu reporterowego IL-8 / lucyferazy w celu zbadania wpływu GSSG i 4-HNE na promotor IL-8 (59). Jak pokazano na Figurze 7F, GSSG i 4-HNE indukowały odpowiednio 400- i 58-krotny wzrost aktywności promotora IL-8. Te odkrycia sugerują, że aktywacja p38 MAPK i wytwarzanie IL-8 lub jej mysiego odpowiednika prawdopodobnie przyczynią się do rekrutacji neutrofili indukowanej przez GSSG i 4-HNE. W oparciu o tę obserwację zbadano rolę GSSG i 4-HNE w modulacji wywołanego antygenem alergicznego zapalenia dróg oddechowych. Wyzwanie uczulonych na RWE myszy za pomocą Amba nie pozwoliło na rekrutację eozynofilów lub zwiększenie całkowitej liczby komórek zapalnych (Figura 7, G i H). Dodanie GSSG lub 4-HNE do materiału do prowokacji zwiększyło rekrutację eozynofili o 3- do 4-krotną i całkowitą liczbę komórek zapalnych o 2- do 3-krotnie (Figura 7, G i H). Wyzwanie z GSSG lub 4-HNE bez Amba nie zwiększyło rekrutacji eozynofilów lub całkowitej liczby komórek zapalnych (dane nie pokazane). Odkrycia te wskazują, że GSSG i 4-HNE wytwarzane przez oksydazę pyłkową NADPH odgrywają istotną rolę w nasilaniu indukowanego antygenem alergicznego zapalenia dróg oddechowych. Ryc. 7 Wpływ sygnału na zapalenie dróg oddechowych. (A) Rekrutacja komórek zapalnych wywołanych prowokacją pRWEOX + i pRWEOX. u naiwnych myszy po 24 godzinach. (B i C) Wpływ GSSG i prowokacji 4-HNE na rekrutację neutrofili (B) i całkowitych komórek zapalnych (C) u naiwnych myszy po 24 godzinach. (D) GSSG i 4-HNE indukują fosforylację tyrozyny (P) p38 MAPK w hodowanych komórkach A549 w sposób zależny od czasu. (E i F) GSSG i 4-HNE indukują wytwarzanie IL-8 (E) i aktywność promotora IL-8 (F) w komórkach A549. (G i H) Wzmocnienie GSSG i 4-HNE Amb a (3 indukuje rekrutację eozynofili (G) i całkowitą liczbę komórek zapalnych (H) u myszy uczulonych na RWE. Próbowaliśmy ustalić, czy zdarzenia indukowane sygnałem (3, które prowadzą do rekrutacji neutrofili (np. Indukcja GSSG i 4-HNE w płynie do wyłożenia dróg oddechowych) mogą przejść do alergicznego zapalenia dróg oddechowych niezależnie od adaptacyjnej odpowiedzi immunologicznej. Po poddaniu myszy WT i NOD SCID działaniu protokołu sensybilizacji RWE, prowokowaliśmy te myszy RWE do generowania sygnałów i 2 u myszy WT i sygnału tylko u myszy NOD SCID. Podejście RWE do myszy WT indukowało około 370- i 8-krotnie większą liczbę eozynofilów i całkowitych komórek zapalnych, odpowiednio niż w myszach NOD SCID po 72 godzinach (Figura 8). Dane te wskazują, że sygnał nie jest wystarczający do wywołania zapalenia alergicznego przy braku sygnału 2. Figura 8 Obecność sygnału 2 (antygen) jest wymagana do wywołania alergicznego zapalenia dróg oddechowych. RWE wywołuje znacząco wyższy stan zapalny w drogach oddechowych myszy WT (zdolnych do przetwarzania antygenu [sygnał 2] i aktywności redoks [sygnał 1], czarne słupki) w 72 godziny w porównaniu do myszy SCID (zdolnych do przetwarzania aktywności redoks [sygnał 1] tylko, białe paski). * P <0,05; P <0,001. Dyskusja Obecnie uważa się, że adaptacyjna odpowiedź immunologiczna odgrywa kluczową rolę w inicjowaniu alergicznego zapalenia wywołanego przez Th2 (12). W tym modelu alergeny są przetwarzane przez komórki dendrytyczne i prezentowane jako peptydy przez MHC klasy II do komórek T (12. 14). Uważa się, że te interakcje prowadzą do kaskady zapalnej, która prowadzi do rekrutacji eozynofilów, neutrofili, limfocytów i makrofagów w ciągu 24. 72 godzin po prowokacji alergenem (12. 14). W niniejszym badaniu po raz pierwszy dowiedzieliśmy się, że ekstrakty pyłkowe z chwastów, drzew i traw posiadają wewnętrzną aktywność oksydazy NADPH, która indukuje ROS w nabłonku dróg oddechowych w ciągu kilku minut, niezależnie od adaptacyjnej odpowiedzi immunologicznej. Nasze dane dodają nowego wymiaru do istniejącego paradygmatu zapoczątkowania alergicznego zapalenia, ponieważ pokazujemy, że ta indukowana przez NADPH oksydaza NAD energicznie wzmacnia specyficzne wytwarzanie IgE i alergiczne zapalenie dróg oddechowych indukowane przez główne antygeny pyłkowe. Proponujemy 2-sygnałowy model antygenu ROS do zapoczątkowania alergicznego zapalenia [przypisy: street workout plan treningowy, aspargin ulotka, typy osobowości wg junga ] [przypisy: dieta przy dnie moczanowej tabela, aspargin ulotka, clotrimazolum ulotka ] [przypisy: dieta przy dnie moczanowej tabela, aspargin ulotka, clotrimazolum ulotka ]